人血清淀粉樣蛋白ELISA檢測試劑盒用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該指標抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗該指標抗體、HRP標記的親和素,經過洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的該指標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
血清淀粉樣蛋白a,英文縮寫SAA,是一種由肝細孢產生的分泌到血清中的一種急性時相蛋白。當機本發生感染或損傷時,可在4-6小時內迅速升高約000倍,當機體將抗原清除后,則迅速降至正常的水平。SAA是診斷病毒細菌感染的敏感指標,在細感染性疾病中,SAA與C反應蛋白相比,它的優勢是上升早,幅度大,靈敏度高。尤其是在急性細菌感染的早期檢測,SAA的優勢更加顯著。SAA在病毒感柒性疾病中,SAA會顯著的增高,但是C反立蛋白不升高,因此SAA可以作為診斷病毒感染的感指標。SAA與C反應蛋白檢測,可鑒別診斷細菌、病毒感染,又能夠提供新的依據,可靠性更強,動態觀察療效,并可指導臨床用藥。
人血清淀粉樣蛋白ELISA檢測試劑盒具有以下特點:
1、靈敏度高:
?、儆心転榇鷾y樣本檢出被檢物質的能力;
?、谟心転榇罅繕悠逢栃詸z出的能力。
2、特異性強:常用交叉反應率表示。含有與待測物相近結構部份的物質可能存在交叉反應,使測定結果升高,可能導致假陽性,所以交叉反應是評價其質量的關鍵指標。
3、精密度準:ELISA試劑一般指其批內CV%,其值應小于15%;定量試劑應同時考察線性范圍。
4、準確度高:通過添加回收實驗進行評價。
5、簡便性強:指在不影響代測樣本的前三項指標的前題下,實驗和測定步驟越少越好,在定性實驗中結果判斷簡單明了,定量試驗結果計算也應簡單。
6、安全性高:試劑盒對操作者和環境安全無害無。
7、經濟性省:試劑盒在同等質量條件下通過大規模生產、技術進步降低成本,使市場價低于同等質量試劑盒,為廣大科研工作者節省相應的科研經費。